Estudio de los mecanismos de muerte celular inducidos por tres flavonoides de Chromolaena tacotana sobre células de cáncer de próstata (PC3) y cérvix (SIHA) – investigación

Abstract

El cáncer es una de las enfermedades más comunes a nivel global que predomina en países menos desarrollados. Entre los cánceres más prevalentes en la población se encuentra el de próstata en hombres y el de cérvix en las mujeres después del cáncer de mama. La creciente resistencia a los tratamientos actuales con agentes anticancerígenos ha estimulado a los investigadores, a realizar una búsqueda de nuevos compuestos que superen estas dificultades. Los productos naturales y sus metabolitos secundarios se han convertido en una alternativa valiosa debido a su actividad antiproliferativa. Al respecto, el presente trabajo busca analizar los mecanismos de muerte celular que se presentan en las células de cáncer de próstata y cérvix expuestas al tratamiento con tres flavonoides aislados de las hojas de Chromolaena tacotana: 3,5,4´-trihidroxi-7-metoxiflavona (CT1), 4´,5 dihidroxi-7 metoxiflavanonol (CT3) y 3´,4´-dihydroxi-5,7-dimethoxiflavanone (CT6), los cuales previamente fueron evaluados en modelos de cáncer de mama y colon demostrando su citotoxicidad. Se analizó el efecto citotóxico en las células tumorales por medio del ensayo de MTT, evaluación cuali-cuantitativa de los cambios morfológicos y tipos de muerte celular haciendo uso de la microscopía de inmunofluorescencia y citometría de flujo. Los resultados obtenidos muestran que en la línea celular PC3, el flavonoide que mayor actividad citotóxica tiene en las células malignas, pero menor toxicidad hacia las células sanas es CT6; en base a las imágenes de inmunofluorescencia se determina que CT1 y CT6 ocasionan cambios morfológicos en las células y, con citometría de flujo se evidencio que CT3 y CT6 inducen apoptosis temprana y el último induce apoptosis tardía de manera significativa, además el flavonoide que mayor induce autofagia es CT3. Por otra parte, en las células SiHa, el ensayo de MTT indico que el flavonoide con mayor actividad citotóxica y mayor selectividad es CT3; en inmunofluorescencia no se obtuvieron resultados significativos y por citometría de flujo, se determinó que el flavonoide que más induce apoptosis temprana es CT6, apoptosis tardía es CT1 y el flavonoide que mayor induce autofagia es CT6.

Cancer is one of the most common diseases globally, predominating in less developed countries. Among the most prevalent cancers in the population is prostate cancer in men and cervical cancer in women after breast cancer. The growing resistance to current treatments with anticancer agents has stimulated researchers to search for new compounds that overcome these difficulties. Natural products and their secondary metabolites have become a valuable alternative due to their antiproliferative activity. In this regard, the present work seeks to analyze the mechanisms of cell death that occur in prostate and cervical cancer cells exposed to treatment with three isolated flavonoids: 3,5,4'-trihydroxy-7-methoxyflavone (CT1), 4 ´,5 dihydroxy-7 methoxy-flavanonol (CT3) and 3´,4´- dihydroxy-5,7- dimethoxyflavanone (CT6), isolated from the leaves of Chromolaena tacotana that were previously evaluated in models of breast and colon cancer, resulting in be cytotoxic. The MTT assay was initially used to evaluate the cytotoxicity and the selectivity index in tumor cells, in addition, immunofluorescence microscopy to identify morphological changes related to apoptosis, autophagy or necrosis, types of cell death that were studied by flow cytometry. The results obtained show that in the PC3 cell line, the flavonoid that has the greatest cytotoxic activity in malignant cells, but less toxicity towards healthy cells is CT6; Based on the immunofluorescence images, it is determined that CT1 and CT6 cause morphological changes in the cells and, with flow cytometry, it was shown that CT3 and CT6 induce early apoptosis and the latter significantly induces late apoptosis, in addition to the flavonoid that most induces autophagy is CT3. On the other hand, in SiHa cells, the MTT assay indicates that the flavonoid with the highest cytotoxic activity and highest selectivity is CT3; In immunofluorescence, no significant results were obtained and by flow cytometry, it was limited that the flavonoid that most induces early apoptosis is CT6, late apoptosis is CT1 and the flavonoid that most induces autophagy is CT6.