Evaluación de la técnica de ELISA indirecta empleando un péptido híbrido derivado de la proteína TRP36 para el diagnóstico de caninos infectados con Ehrlichia canis

Abstract

Ehrlichia canis es el agente causal de la ehrlichiosis monocitica canina (ECM), enfermedad que requiere de pruebas para diagnosticar con mayor capacidad discriminatoria entre otros microorganismos de la familia Anaplasmatacea, con los cuales se puede presentar coinfección y presentar reacción cruzada. Por consiguiente, el presente estudio analizó el ensayo de ELISA indirecto teniendo como antígeno un péptido híbrido derivado de las porciones repetidas en tándem de la proteína TRP-36. Para de esta manera detectar anticuerpos de caninos infectados con E. canis y contribuir a mejorar la capacidad diagnostica. Para esto, se determinaron los valores de efecto Elisa y prozona, seguido de la evaluación de la ELISA empleando muestras perros sintomáticos y asintomáticos que permitió identificar una sensibilidad (Se) de 57.1%, especificidad (Ep) 100%, TFP (43%), TFN (0%), VPP (25%), VPN (100%) y eficacia (36%) relacionados con la población de muestras analizadas. Por otro lado, se realizó la evaluación de la ELISA empleando muestras previamente diagnosticadas con la prueba de ANIGEN fundamentado en la TRP-19. Con esta evaluación, se identificó una Se de 69%, Sp de 33%, PPV de 66,7%, PPN de 35,7%, TFN de 0,310, TFP de 0,667, Rver positiva de 1,034 y negativa de 0,931. Finalmente, se realizó la prueba de campo para identificar muestras de un área endémica, demostrando una diferencia estadística significativa p >0,05 entre muestras positivas y negativas. Con el conjunto de las pruebas realizadas, se comprobó la precisión y exactitud del ensayo demostrando la capacidad discriminatoria de la prueba. De igual forma, el antígeno empleado tiene características que lo denominan especie-específico, lo cual le otorga una ventaja sobre otras pruebas que puedan presentar reacciones cruzadas con otros agentes e identificar caninos positivos.

Ehrlichia canis is the causal agent of canine monocytic ehrlichiosis (CME), a disease that requires tests to diagnose with greater discriminatory capacity among other microorganisms of the Anaplasmatacea family, with which co-infection and cross-reaction may occur. Therefore, the present study analyzed the indirect ELISA assay having as antigen a hybrid peptide derived from the tandemly repeated portions of the TRP-36 protein. To detect antibodies from canines infected with E. canis and contribute to improving diagnostic capacity. For this, the Elisa and prozone effect values were determined, followed by the ELISA evaluation using symptomatic and asymptomatic dog samples, which allowed identifying a sensitivity (Se) of 57.1%, specificity (Ep) 100%, TFP (43%), TFN (0%), PPV (25%), NPV (100%) and efficacy (36%) related to the population of samples analyzed. On the other hand, the ELISA evaluation was carried out using samples previously diagnosed with the ANIGEN test based on TRP-19. With this evaluation, a Se of 69%, Sp of 33%, PPV of 66.7%, PPN of 35.7%, TFN of 0.310, TFP of 0.667, positive Rver of 1.034, and negative of 0.931 were identified. Finally, the field test was carried out to identify samples from an endemic area, showing a significant statistical difference of p>0.05 between positive and negative samples. With all the tests carried out, the precision and accuracy of the test were verified, demonstrating the discriminatory capacity of the test. Similarly, the antigen used has characteristics that call it species-specific, which gives it an advantage over other tests that may present cross-reactions with other agents and identify positive canines.