Evaluación del potencial antiproliferativo de dos chalconas Aisladas de inflorescencias de Chromolaena tacotana r.m. king & h. Rob sobre líneas celulares de cáncer de colon

Abstract

El potencial anticancerígeno de la especie Chromolaena tacotana ha sido objeto de estudio en los últimos años debido a su alto contenido de flavonoides citotóxicos en hojas e inflorescencias. En esta investigación se pretende evaluar la actividad de dos chalconas presentes en las inflorescencias de la planta, cuyo potencial anticancerígeno no había sido estudiado, la 2’4-dihidroxi-4’,6’- dimetoxichalcona (CHA1) y la 2’, 3,4-trihidroxi-4’,6’-dimetoxichalcona (CHA2) sobre las líneas celulares de cáncer de colon RKO y HT-29, que difieren por el estado del gen que codifica para la proteína p53. La actividad citotóxica de los flavonoides fue evaluada mediante el ensayo MTT, en el que ambos flavonoides mostraron una actividad citotóxica con valores de IC50 inferiores a los del control positivo quercetina. Posteriormente, se identificaron cambios en los microtúbulos y núcleos de las células por medio de microscopia de fluorescencia indirecta, evidenciando pérdida de la integridad morfológica en las células. Por otra parte, se determinó que los flavonoides inducen pérdida del potencial de membrana mitocondrial evaluado cualitativamente mediante el ensayo JC-10. Finalmente, se seleccionó la línea celular más sensible a los tratamientos y en esta se identificó la activación de las caspasas -3 y -7 que son enzimas que intervienen en el proceso de muerte celular apoptótico, asimismo, se realizó la identificación de la proteína p53 que además de estar presente en condiciones normales en la célula RKO, también se relaciona con dicho proceso. Los resultados indican que tanto CHA1 como CHA2 tienen efecto antiproliferativo en las líneas celulares RKO y HT-29, el cual podría estar relacionado con el estado de la proteína p53, puesto que se evidenció mayor sensibilidad en la línea celular RKO, además, para esta línea no se presentan diferencias significativas en los valores de IC50 calculados para cada flavonoide, lo que indica que la actividad en estas células es independiente de las diferencias estructurales de las dos chalconas.

The anticancer potential of the Chromolaena tacotana species has been studied in recent years due to its high content of cytotoxic flavonoids in leaves and inflorescences. The purpose of this research is to evaluate the activity of two chalcones present in the inflorescences of the plant, whose anticancer potential had not been studied, 2'4-dihydroxy-4 ', 6'-dimethoxichalcone (CHA1) and 2', 3 , 4-trihydroxy-4 ', 6'-dimethoxyhalcone (CHA2) on colon cancer cell lines RKO and HT-29, which differ by the status of the gene encoding the p53 protein. The cytotoxic activity of flavonoids was evaluated using the MTT assay, in which both flavonoids showed cytotoxic activity with IC50 values lower than those of the quercetin positive control. Subsequently, changes in the microtubules and nucleus of the cells were identified by means of indirect fluorescence microscopy, showing loss of morphological integrity in the cells. On the other hand, flavonoids were determined to induce loss of the mitochondrial membrane potential evaluated qualitatively by the JC-10 assay. Finally, the cell line most sensitive to the treatments was selected and in this, the activation of caspases -3 and -7, which are enzymes that intervene in the apoptotic cell death process, was identified. Likewise, the identification of the p53 protein was carried out that in addition to being present under normal conditions in the RKO cell; it is also related to this process. The results indicate that both CHA1 and CHA2 have an antiproliferative effect on the RKO and HT-29 cell lines, which could be related to the state of the p53 protein, since greater sensitivity was evidenced in the RKO cell line, in addition, for this There are no significant differences in the IC50 values calculated for each flavonoid, indicating that the activity in these cells is independent of the structural differences of the two chalcones.