Adaptación del virus de gumboro a diferentes cultivos celulares

Abstract

Con el fin de lograr un sustrato útil para multiplicar el virus de la Enfermedad Infecciosa de la Bolsa (virus de Gumboro), células de origen diferente al aviar, se infectaron con distintas cepas del virus de Gumboro. Células MDBK (riñón de bovino), BGM 70 (riñón de mono) y VERO (riñón de mono verde), así como a cultivo primario de células de córnea bovina se infectaron con tres cepas de campo y una cepa de referencia (Lukert). Como control de crecimiento del virus, se empleó cultivo primario de fibroblastos de embrión de pollo. La adaptación viral a los cultivos celulares se determinó mediante la identificación del efecto citopático, titulación viral a las 48 y 72 horas posinfección, pruebas de inmunoperoxidasa directa y de microscopía electrónica y se confirmó por RT- PCR. En el proceso de adaptación viral, se observó que tanto las cepas de campo como la cepa de referencia del virus presentaron reducción en su patogenicidad al pasar directamente de células aviares a células bovinas, pero mostraron incremento en su patogenicidad en células bovinas, cuando fueron previamente cultivadas en células de mono. La adaptación del virus de la Enfermedad de Gumboro a cultivos celulares de origen bovino genera una alternativa adicional para el estudio in vitro del virus útil para estudios virales.

To find a suitable substrate to properly replícate the Infectious Bursal Disease (Gumboro) Virus (ÍBDV), cells of non avian-origin were infected with different strains of the Gumboro virus. Madin-Darby Bovine Kidney Epithelial Cells (MDBK cell Line), BGM 70 (Baby Grivet monkey kidney) and the VERO (Green monkey kidney) line, as well as a primary cell culture of bovine cornea were infected with three field strains and the Lukert IBDV reference strain. Chicken embryo fibroblasts primary cultures were used as control for viral growth. Viral adaptation to these cell cultures was assessed by the visualization of the cytopathic effect, viral titres recorded 48 and 72 hours post-infection, by tests of direct immuno- detection, by electronic microscopy and confir- med by RT-PCR. Both types of IBDV strains (field and reference strains), during the viral adaptation period, showed reduction in their pathogenicity when transferred fromavian to bovine cell culture systems. In contrast, this pathogenicity was increased when the viral passage was made from the monkey cell line to any of the bovine cell culture systems. The adaptation of the IBDV strains in this study to cell cultures of bovine origin creates an additional alterna tive option for the in vitro study of the Gumboro disease virus.