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Capacidad de anticuerpos anti-péptido derivado del virus de la fiebre aftosa para reconocer la proteína nativa del virus de la fiebre aftosa

García Castiblanco, Sebastián (Bogotá : Universidad de Ciencias Aplicadas y Ambientales, 2019Facultad de Ciencias AgropecuariasMedicina Veterinaria, 2019)

La fiebre aftosa es un virus de fácil diseminación, con altas tasas de morbilidad por esto sigue siendo una de las principales pérdidas económicas tanto para importación como para exportación de ganado bovino y sus derivados, ...
Evaluación preliminar de dos métodos para el diagnóstico de la anemia infecciosa equina por la técnica de reacción en cadena de la polimerasa

Meza Barreto, Giovanna; Mendoza I., Alberto (Bogotá : Universidad de Ciencias Aplicadas y Ambientales, 2003, 2003-09)

La Anemia Infecciosa Equina (AlE), el “sida" de los caballos es una enfermedad infectocontaaiosa causada por un Lentivirus de la familia Retroviridae. Se diagnostica en Colombia mediante pruebas serológicas tales como ...
The First Chemically-Synthesised, Highly Immunogenic Anti-SARS-CoV-2 Peptides in DNA Genotyped Aotus Monkeys for Human Use

Patarroyo, Manuel-Elkin; Patarroyo, Manuel-Alfonso; Alba, Martha patricia; Pabon, Laura; Rugeles, Maria T.; Aguilar Jimenez, Wbeimar; Florez, Lizdany; Bermudez, Adriana ; Rout, Ashok K; Griesinger, Christian; Suárez Martínez, Carlos Fernando; Aza-Conde, Jorge (2021)

Thirty-five peptides selected from functionally-relevant SARS-CoV-2 spike (S), membrane (M), and envelope (E) proteins were suitably modified for immunising MHC class II (MHCII) DNA-genotyped Aotus monkeys and matched with ...
Título de la evaluación de la capacidad de seroneutralización "in vitro" de los anticuerpos generados frente a péptidos químicamente sintetizados y modificados para el control de la fiebre aftosa en bovinos

Camargo Castañeda, Andrea (Bogotá : Universidad de Ciencias Aplicadas y Ambientales, 2019Facultad de Ciencias AgropecuariasMedicina Veterinaria, 2019)

La Fiebre Aftosa es considerada como una de las enfermedades más importantes de los animales ungulados, es decir, bovinos, porcinos, caprinos, ovinos y bufalinos tanto domésticos como salvajes. Esta enfermedad es causada ...

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Capacidad de anticuerpos anti-péptido derivado del virus de la fiebre aftosa para reconocer la proteína nativa del virus de la fiebre aftosa
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García Castiblanco, Sebastián | 2019

La fiebre aftosa es un virus de fácil diseminación, con altas tasas de morbilidad por esto sigue siendo una de las principales pérdidas económicas tanto para importación como para exportación de ganado bovino y sus derivados, este estudio buscó evaluar la capacidad de los anticuerpos anti-péptido derivado del virus de la fiebre aftosa para reconocer la proteína nativa de los serotipos A24 Cruzeiro y O1 Campos del virus de la fiebre aftosa. Para lo cual se utilizaron 23 sueros bovinos, 17 de ellos fueron inmunizados con la mezcla de péptidos candidatos a vacuna, 3 con vacuna convencional, 2 con adyuvante y se dejó un animal que actuó como centinela. Para alcanzar el objetivo, se emplearon tres técnicas de inmunodiagnóstico que fueron, citometría de flujo, inmunofluorescencia indirecta y ensayo de competición mediante la técnica ELISA. En la citometría de flujo y en la inmunofluorescencia indirecta los anticuerpos tuvieron un mayor reconocimiento hacia el serotipo O1 Campos comparado con el serotipo A24 Cruzeiro; en el ensayo de competición, hubo mayor reconocimiento el serotipo A24 Cruzeiro en donde los anticuerpos tuvieron la capacidad de reconocer las proteínas VP1, VP2 y VP3, en tanto que para el serotipo O1 Campos hubo reconocimiento para las proteínas VP1 y VP3. Con base en los resultados obtenidos se sugiere realizar cambios a los péptidos candidatos a vacuna con el fin de aumentar el reconocimiento a las proteínas estructurales del virus de la fiebre aftosa, para la prevención de la enfermedad en el ganado bovino

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Evaluación preliminar de dos métodos para el diagnóstico de la anemia infecciosa equina por la técnica de reacción en cadena de la polimerasa
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Meza Barreto, Giovanna | 2003-09

La Anemia Infecciosa Equina (AlE), el “sida" de los caballos es una enfermedad infectocontaaiosa causada por un Lentivirus de la familia Retroviridae. Se diagnostica en Colombia mediante pruebas serológicas tales como inmunodifusión (Coggins) y ELISA técnicas que eventualmente pueden arrojar resultados falsos positivos y falsos negativos, razón por la cual se crea la necesidad de estandarizar una prueba de Biología Molecular, como la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) que permita detectar la presencia o ausencia del virus en los animales. En el presente trabajo se evaluaron dos metodologías de PCR para la estandarización de dicha técnica, con fines de diagnóstico de la Anemia Infecciosa Equina. El método uno consistió en una técnica sencilla de PCR cuyos iniciadores “Primer A" (PA) y “Primer B" (PB) flanquean una región de 510 pares de bases (pb) correspondiente al gen gag del Virus de la Anemia Infecciosa Equina (VAIE). El método dos contempló la técnica de PCR anidada con los iniciadores externos “Primer E” (PE) y “Primer F” (PF) que flanquean una región de 780 pb; los “Primers C” (PC) y “Primers D” (PD), como iniciadores internos que flanquean una región de 410 pb del gen gag del VAIE. Los resultados mostraron que el método uno permite amplificar segmentos compatibles con el gen gag del VAIE, pero solo en las muestras controles positivos y no en las muestras del banco de ADN provenientes de animales serológicamente positivos al VAIE. El método dos permitió amplificar segmentos de aproximadamente 800 y 400 pb del gen gag del VAIE, tanto en las muestras controles positivos como en las muestras seropositivas del banco de ADN, indicando mayor sensibilidad que el método uno; sin embargo se presentaron bandas de carácter inespecífico de peso molecular de 300pb aproximadamente. Para la detección de| provirus AIE en muestras de sangre de equinos asintomáticos, se recomienda emplear la modalidad de PCR anidada.

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The First Chemically-Synthesised, Highly Immunogenic Anti-SARS-CoV-2 Peptides in DNA Genotyped Aotus Monkeys for Human Use
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Patarroyo, Manuel-Elkin | 2021

Thirty-five peptides selected from functionally-relevant SARS-CoV-2 spike (S), membrane (M), and envelope (E) proteins were suitably modified for immunising MHC class II (MHCII) DNA-genotyped Aotus monkeys and matched with HLA-DRβ1* molecules for use in humans. This was aimed at producing the first minimal subunit-based, chemically-synthesised, immunogenic molecules (COLSARSPROT) covering several HLA alleles. They were predicted to cover 48.25% of the world’s population for 6 weeks (short-term) and 33.65% for 15 weeks (long-lasting) as they induced very high immunofluorescent antibody (IFA) and ELISA titres against S, M and E parental native peptides, SARS-CoV-2 neutralising antibodies and host cell infection. The same immunological methods that led to identifying new peptides for inclusion in the COLSARSPROT mixture were used for antigenicity studies. Peptides were analysed with serum samples from patients suffering mild or severe SARS-CoV-2 infection, thereby increasing chemically-synthesised peptides’ potential coverage for the world populations up to 62.9%. These peptides’ 3D structural analysis (by 1H-NMR acquired at 600 to 900 MHz) suggested structural-functional immunological association. This first multi-protein, multi-epitope, minimal subunit-based, chemically-synthesised, highly immunogenic peptide mixture highlights such chemical synthesis methodology’s potential for rapidly obtaining very pure, highly reproducible, stable, cheap, easily-modifiable peptides for inducing immune protection against COVID-19, covering a substantial percentage of the human population

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Título de la evaluación de la capacidad de seroneutralización "in vitro" de los anticuerpos generados frente a péptidos químicamente sintetizados y modificados para el control de la fiebre aftosa en bovinos
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Camargo Castañeda, Andrea | 2019

La Fiebre Aftosa es considerada como una de las enfermedades más importantes de los animales ungulados, es decir, bovinos, porcinos, caprinos, ovinos y bufalinos tanto domésticos como salvajes. Esta enfermedad es causada por un virus perteneciente al género Aphthovirus de la familia Picornaviridae y ha estado presente en prácticamente todo el mundo. Hoy en día, sigue afectando a más de 100 países, causando importantes pérdidas económicas. La vacunación es una de las principales herramientas probadas para manejar y hasta eliminar la enfermedad, el problema es que las vacunas comerciales usan el virus inactivado y esto puede causar respuestas alérgicas. Además, la inactivación de tales vacunas no siempre es perfecta y el patógeno puede volver a su estado virulento. El posible vertimiento del patógeno al medio ambiente, la mala estabilidad y la necesidad de una cadena de frío para conservar la vacuna, son otras desventajas significativas de las vacunas convencionales. La mayor desventaja de las vacunas convencionales es que estas son diseñadas para inmunizar al animal con cepas (serotipo) específicas. Una alternativa novedosa para resolver estos inconvenientes es diseñar una vacuna usando péptidos químicamente modificados. En este trabajo se analizó la capacidad de seroneutralización “in vitro”. de los anticuerpos producidos en animales vacunados con el candidato vacunal al enfrentar anticuerpos del suero contra los serotipos A24 Cruzeiro y O1 Campos del virus vivo. Para identificar y analizar la eficacia de los anticuerpos producidos contra la FA, se realizó la microprueba cuantitativa de neutralización viral sugerida por la OIE. Se trabajó con el suero de 23 bovinos (17 animales inmunizados con la formulación péptido + adyuvante Montanide ISA 70M, 3 animales vacunados con la vacuna convencional, 2 animales control adyuvante y 1 animal centinela). Para verificar que no existieran anticuerpos frente a los péptidos que se querían probar, se usaron los sueros obtenidos en la sangría inicial y posteriormente, se trabajó con los sueros obtenidos el día 43 post primera inmunización. Se observó que hubo una seroneutralización del 79.6% cuando los sueros fueron enfrentados al virus vivo del serotipo A24, mientras que al ser el enfrentamiento con el serotipo O1 hubo una seroneutralización menor (41.2%). Ningún animal centinela o control adyuvante tuvo títulos mayores a 1:45, y la vacuna convencional alcanzó títulos mayores de 1:6000. Estos valores indican que la prueba se realizó en condiciones ideales, que favorecieron resultados válidos. Para ser la primera formulación peptídica, la producción y neutralización de los anticuerpos generados contra el virus fue muy buena en ambos serotipos. Es importante seguir realizando estudios que aporten al conocimiento de las vacunas peptídicas. Esta técnica se usa actualmente para la formulación de la vacuna contra la malaria y en un futuro podría ser la forma más eficiente de fabricar todo tipo de vacunas. En el caso de la fiebre aftosa, es importante realizar pruebas de VNT frente a otros serotipos (C, SAT1, SAT2, SAT3 y Asia 1) para determinar si la vacuna sintética es apta para su distribución mundial.

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Evaluación preliminar de dos métodos para el diagnóstico de la anemia infecciosa equina por la técnica de reacción en cadena de la polimerasa

The First Chemically-Synthesised, Highly Immunogenic Anti-SARS-CoV-2 Peptides in DNA Genotyped Aotus Monkeys for Human Use

Título de la evaluación de la capacidad de seroneutralización "in vitro" de los anticuerpos generados frente a péptidos químicamente sintetizados y modificados para el control de la fiebre aftosa en bovinos