Envíos recientes

Estudio de los mecanismos moleculares de la acción antiproliferativa del Gibbilimbol B mediante aproximaciones proteómicas y bioinformáticas

Cardona Ramírez, Carolina | 2021-09-20

Durante el segundo semestre del año 2020 se trabajo en la obtención de los IC50 del compuesto para las líneas celulares MCF7 y MDAMB. Se estimó una concentración de trabajo para ambos compuestos por debajo del valor de IC50. Lo anterior, para obtener población celular de análisis suficiente para los ensayos de proteómica. Las incubaciones se realizaron a 3 tiempos distintos (8,16 y 24 horas). Las células se colectaron, se lisaron, se liofilizaron y se prepararon para los ensayos proteómicos. A continuación, se detalla el flujo de actividades realizadas en Málaga y España: Los análisis por Label-free se exportaron a un excel que resume los resultados de la cuantificación relativa de proteínas en las muestras. Es importante resaltar que se decidió inyectar en el espectrómetro de masas cada una de las muestras después de la ejecución de un blanco. Esto se hace para evitar el posible arrastre de muestras inyectadas con anterioridad en la columna cromatográfica. Los ficheros exportados del Orbitrap se procesaron según el flujo de trabajo que data en la siguiente imagen: Tomada de : https://ars.els-cdn.com/content/image/1-s2.0-S1874391920300373-ga1_lrg.jpg Posteriormente, se realizaron los análisis bionformáticos usando Perseus, Cytoscape para la creación de redes de proteínas, y Cluego para la identificación de vías metabólicas implicadas [1-3]. Se realizaron ensayos de validación de muerte celular mediante citometría de flujo e inmunotransferencia Western que confirman la presencia de activación de la vía de las caspasas para la inducción de la muerte celular programada. La estandarización de estos ensayos permitió la validación de la actividad de estas vías a diferentes concentraciones usando el siguiente flujo de trabajo: El número de células dependiente de las fases de crecimiento exponencial propias de cada tipo celular es crítico en este tipo de procedimientos. En este sentido, se trabajaron siempre concentraciones de trabajo que permitieran obtener como mínimo entre 250-500 células/mL, en placas de 24 wells.

Estudio fitoquímico de la especie P. imperiale y evaluación de su actividad citotóxica en la línea celular MCF 7 (cáncer de mama)

Gantiva Rojas, Michelle | 2021

La caracterización de metabolitos presentes en las plantas ha beneficiado a diferentes ramas de la ciencia, estas tienen una amplia diversidad estructural lo que les permite tener diferentes características y ser usadas en diferentes campos de acción. En esta investigación se explora la composición de la madera de la especie P. imperiale. Este género ha sido ampliamente estudiado debido a que muchos de los metabolitos encontrados tienen actividad biológica. El objetivo de este proyecto fue aislar y caracterizar estructuralmente algunos componentes presentes en el extracto de esta planta, posteriormente analizar su actividad citotóxica en la línea de cáncer MCF-7. Fueron caracterizados parcialmente dos compuestos, uno de ellos con la posible estructura de un terpeno, mientras que el otro fue identificado como un alcaloide mediante la prueba de Dragendorff. Para el ensayo de actividad citotóxica se realizó un análisis mediante la técnica MTT, se probó en la línea de cáncer de mama MCF7 y en una línea celular sana de fibroblastos de pulmón MRC5 para comparar la incidencia de este compuesto en las células sanas. Se obtuvo que el alcaloide encontrado tiene efecto en las células de cáncer, pero también tiene un efecto en las células sanas estudiadas

Estudio fitoquímico de la especie Piper Imperiale y evaluación de su actividad citotóxica en la línea celular MDA-MB-231 (cáncer de mama)

Amaya Marín, Paula Andrea | 2021

El presente trabajo muestra los resultados obtenidos del estudio fitoquímico del extracto etanólico de madera de la especie Piper imperiale. Este estudio se realizó con el fin de contribuir con el conocimiento químico y de actividad biológica del género Piper, particularmente con los resultados de actividad citotóxica en líneas celulares de cáncer humano. Del extracto etanólico de madera de P. imperiale se lograron aislar 2 compuestos nombrados como CV y P1, donde el compuesto CV fue propuesto como un compuesto terpénico y P1 como un compuesto alcaloidal. Ambos compuestos se compararon mediante CCD con un patrón de berberina, y el revelado de dragendorff para el compuesto P1 mostró que el compuesto dio prueba positiva para alcaloides, con este resultado de P1 se realizó la prueba de viabilidad celular, mediante la técnica de MTT, tiendo como resultado del compuesto P1 presentó moderada toxicidad en células sanas de pulmón, y baja toxicidad en células de cáncer de mama.

Estudio fitoquímico de madera de Piper eriopodon y evaluación de su actividad citotóxica en células de cáncer de mama

Rincón Santana, Edgar José | 2021

En este trabajo, se evaluó el efecto citotóxico de dos compuestos aislados de la madera de la especie P. eriopodon (Piperaceae), por medio del ensayo MTT en líneas celulares de cáncer de mama MCF-7 y MDA-MB-231. El fraccionamiento del extracto etanólico de la madera de P. eriopodon llevó al aislamiento de los compuestos gibbilimbol B y aristolactama B II cuyas estructuras fueron establecidas mediante el análisis de sus datos espectroscópicos (RMN 1H, 13C, 1D Y 2D) y la comparación con los datos reportados en la literatura. Ambos compuestos demostraron tener propiedades citotóxicas en células de cáncer de mama, donde el gibbilimbol B demostró tener un efecto citotóxico más potente con un valor de IC50= 16,80 µg/mL para células MCF-7 y un valor de IC50= 19,21 µg/mL para células MDA-MB-231. El compuesto aristolactama B II presento valores de IC50= 115,3 µg/mL y IC50= 49,46 µg/mL para células de cáncer de mama MCF-7 y MDA-MB-231 respectivamente, donde se evidenció una mejor actividad inhibitoria del crecimiento en la línea celular MDA-MB-231 (triple negativo). Con estos resultados se evidencia el potencial de la especie P. eriopodon como reservorio de compuestos potencialmente bioactivos en la búsqueda de compuestos naturales con gran potencial citotóxico.

Estudio fitoquímico preliminar de la fracción polar de raíz de Zanthoxylum caribaeum (Rutaceae)

Diaz Valbuena, Geraldine | 2021

El material vegetal de Zanthoxylum caribaeum fue recolectado en el municipio de Apulo departamento Cundinamarca, una vez seco se sometió al proceso de extracción con etanol mediante maceración; y luego se realizó un fraccionamiento sólido-liquido por cromatografía líquida al vacío al extracto etanólico de la raíz. A partir de algunas de las fracciones obtenidas se realiza el presente estudio, las cuales fueron suministradas por el grupo de investigación en productos naturales Quipronab de la Universidad Nacional de Colombia. De esta manera, se realizó un estudio cromatográfico para separar y purificar algunos de los compuestos presentes en dichas fracciones, mediante cromatografía en capa fina (CCF), cromatografía en columna (CC) y cromatografía líquida al vacío (CLV). La identificación y elucidación estructural de los compuestos aislados se realizó por medio de reactivo de Dragendorff y técnicas espectroscópicas de RMN. En total se lograron identificar dos compuestos mayoritarios de las raíces de la especie Zanthoxylum caribaeum. Estos compuestos son de tipo alcaloidal, el cual uno de ellos se identificó como berberina y el otro fue identificado como el ácido 3-(9H- β-carbolin-1-il) propanoico, el cual mostró tener un efecto neuroprotector frente al neurotóxico paraquat en células SHSY5Y a concentraciones de 0.1 μg/mL.

Estudio fitoquímico y evaluación de la actividad antioxidante del extracto etanólico de la madera de la especie Piper eriopodon (PIPERACEAE)

Lizarazo Castellanos, Jenny Marcela | 2013

A partir del extracto etanolico de madera de la especie Piper eriopodon se encontraron, en las pruebas fitoquímicas preliminares, compuestos de tipo esteroide, nafto y/o antraquinonas y cumarinas. Los resultados obtenidos para la evaluación de la actividad antioxidante del extracto etanolico de la madera de Piper eriopodon muestra un comportamiento similar con respecto al estándar de trolox, presentando una IC50 de 48,13μg/mL reaccionando de manera similar al trolox y disminuyendo al 50% la absorbancia inicial del DPPH (0,004% en metanol). Se determinó la presencia de diez esteres de ácidos grasos y tres compuestos de tipo esteroidal presentes en una mezcla de los cuales se logró identificar uno mediante técnicas de análisis instrumental como RMN1H, espectrometría de masas por impacto electrónico, comparando con bases de datos y lo reportado en la literatura como el 3-ceto, 4-metil, 22- estigmasteno.

Semillero de Investigación ORIATROS - Biología celular y molecular del cáncer: Informe de actividades 2020-II

Méndez Callejas, Gina Marcela | 2021-02-15

Semillero de Investigación ORIATROS - Biología celular y molecular del cáncer: Informe de actividades 2021-I

Méndez Callejas, Gina Marcela | 2021-06-23