Envíos recientes

Actividad antioxidante y citotóxica de los extractos y fracciones de hojas e infloescencias de Ageratina gracilis

Vera Díaz, Yeniffer Patricia | 2016

El cáncer de seno constituye una de las grandes causas de mortalidad en todo el mundo, esta patología se presenta como un problema de salud pública que tiene un incremento significativo. La búsqueda de agentes antioxidantes y antitumorales aislados de plantas colombianas ha aumentado gracias a la identificación de metabolitos secundarios con propiedades especiales; tal es el caso de los flavonoides de especies de la familia Asteraceae. De esta manera, se pretende evaluar en la especie Ageratina gracilis (Asteraceae) su actividad antioxidante y citotóxica, de las cuales no existe hasta el momento ningún reporte científico. La actividad antioxidante evaluada por el método DPPH mostró el mejor IC50 en la fracción etanólica de hojas polar 1,55 mg/l, pero no mejor que los controles positivos Quercetina 0,99 y Trolox 0,06 mg/l, por otra parte mediante la técnica MTT se determinó actividad citotóxica sobre la línea celular MDA-MB-231 derivada de cáncer de seno siendo la fracción clorofórmica de hojas apolar la de mejor concentración efectiva media con un valor de 7,75 μg/ml.

Actividad antioxidante y citotóxica de los extractos y fracciones de hojas e inflorescencias de Lourteigia microphylla

Diosa Martín, Lizeth Stefany | 2015

Dada la amplia biodiversidad de la flora colombiana y el poco estudio que existe a nivel fitoquímico como de elucidación de las actividades biológicas en las plantas presentes en el territorio nacional, se realizó la determinación de la capacidad antioxidante y citotóxica de extractos y fracciones de Lourteigia microphylla (anterior Eupatorium microphyllum) mediante la técnica de DPPH y pruebas de citotoxicidad en la línea de cáncer de seno MDA-MB 231 con la técnica de MTT. Se obtuvieron cuatro extractos totales de hojas e inflorescencias con Etanol y Éter de petróleo mediante la técnica de Soxhlet, que luego se fraccionaron con Éter de petróleo, Cloroformo, Acetato de etilo y Etanol usando la misma técnica, a todos estos extractos se les realizaron Screening primarios a nivel antioxidante y citotóxico a fin de reducir el número de muestras. Se escogieron las muestras E1HP (Extracto total hojas polar), F2E1HP (Fracción Cloroformo del Extracto de hojas polar), F1E1HP (Fracción etérea del Extracto de hojas polar), E3IP (Extracto total inflorescencias polar) y F1E3IP (Fracción etérea del Extracto de inflorescencias polar) a las cuales se les realizo la medición de la capacidad antioxidante y citotóxica obteniendo los valores centralizados de IC50 y EC50, evidenciando diferencias estadísticamente significativas entre los extractos y fracciones. Los extractos que se destacaron en la captación de radicales libres fueron el extracto de inflorescencias polar (IC50=38,90 ± 0,026) y la fracción etanólica de hojas polar (IC50= 40,24 ± 0,025), al igual que el extracto de inflorescencias polar (EC50=1,90 ± 0,24) a nivel citotóxico.

Combretastatin A-4 induces p53 mitochondrial-relocalisation independent-apoptosis in non-small lung cancer cells

Méndez Callejas, Gina Marcela | 2014

CombretastatinA-4(CA-4)isoneofthemosteffectiveagentsusedinchemotherapy.Nevertheless,thecontributionofp53and Bim proteins in the CA-4-induced apoptosis in non-small lung cancer cells (NSCLC) remains unresolved, specifically on involving of p53 in the mitochondrial pathway activation by a transcription-independent mechanism. In this context, the p53null H1299 and wt-p53 H460 NSCLC cells, in the absence and presence of pifithrin-m (PFTm), an inhibitor of p53 mitochondrial-translocation, were treated with CA-4 and different cellular endpoints were analysed. In contrast to previous observationsinH460cells,CA-4failedintheactivationofanapoptoticresponseinH1299cells,thusindicatinganinvolvement of p53 in the cell death induced by the drug. We found that CA-4 led to p53 cellular re-localisation in H460 cells; in particular, p53 was released from the microtubular network and accumulated at mitochondria where it interacts with Bim protein and other proteins of the Bcl-2 (B-cell leukaemia-2) family, leading to cytochrome c release, alteration in the mitochondrial membrane polarisation, cell cycle arrest at the G2/M-phase, and cell death. Interestingly, the cytosolic and the mitochondrial accumulation of protein Bim was strictly dependent on p53 status. The extent of cell death was not reduced in H460 after combinedtreatmentofPFTmwithCA-4.Overall,thedatasupportamodelofCA-4-inducedapoptosisinNSCLC,forwhichthe expression of p53 protein is essential, but its mitochondrial function, linked to p53-transcription independent apoptosis pathway, is negligible.

Evaluación de la actividad citotóxica de flavonoides aislados de las hojas de Chromolaena tacotana (Klatt) R. M. King & H. Rob sobre líneas celulares cancerosas

Reyes Reyes, Ana Isabel | 2016

La especie Chromolaena tacotana se encuentra ampliamente distribuida en Colombia, facilitando su recolección para realizar diversos estudios, entre ellos su actividad antifúngica y antimicrobiana, aunque no se han realizado suficientes estudios con respecto a la actividad anticancerígena de la misma, razón por la cual se realiza este proyecto, cuya finalidad es evaluar la actividad citotóxica de los flavonoides 3, 5, 4’- trihidroxi – 7 – metoxiflavona (CT1), 3,5,8 – trihidroxi -7,4' dimetoxiflavona (CT2), 5,4’ – dihidroxi – 7 – metoxiflavanonol (CT3) y 5, 7, 3’, 4’ – tetrahidroxi – 3- metoxiflavona (CT4) presentes en las hojas de Chromolaena tacotana en líneas celulares cancerosas A549, HT29, PC3, SiHa, MDA-MB-231 y la línea no cancerosa MRC5. Se utilizó el método de determinación de viabilidad celular MTT para evaluar la actividad citotoxica. Todos los flavonoides presentan actividad citotóxica en las líneas evaluadas, sin embargo el flavonoide CT2 fue el que presento mayor efecto antiproliferativo. La integridad del núcleo de las células tratadas con el flavonoide 3, 5,8 – trihidroxi -7,4' dimetoxiflavona ó 3, 5,7-trihidroxi-8,4´dimetoxiflavona se evaluó por microscopia de fluorescencia mediante la tinción con DAPI encontrando una alteración de éste organelo en todas las líneas evaluadas

Polimorfismo Inserción /Deleción, del gen ACE en atletas de élite Colombianos en deportes de resistencia

Rodríguez Buitrago, Jeansy Alonso | 2021-12-09

Los factores genéticos son factores decisivos en el deporte dado que estos factores permiten determinar una predisposición en el desarrollo de procesos adaptativos necesarios para la mejora del rendimiento deportivo. Diferentes estudios han identificado genes y polimorfismos que se asocian con el desarrollo de las capacidades físicas, como el ACTN3 o la ECA, información que contribuye en los procesos de selección y orientación de los talentos deportivos. Investigaciones relacionadas con el gen ACE I/D son limitadas en países de América, encontrando la mayoría de los estudios realizados en países de Europa, Asia y África (Gómez-Gallego et al., 2010). En el caso de Colombia, los deportistas han obtenido destacados resultados competitivos a nivel nacional e internacional, especialmente en las pruebas de resistencia, sin embargo, los estudios de identificación de factores genéticos son limitados, por tanto, observar la frecuencia genotípica de genes, especialmente, del gen ACE en los atletas de resistencia y su asociación con el máximo rendimiento fue el objetivo del proyecto lo cual permitirá contribuir a futuro en los procesos de identificación de talentos deportivos. Para el desarrollo del proyecto se realizó un proceso de identificación y selección de la muestra poblacional, la muestra fue distribuida en dos grupos, un grupo de deportistas profesionales o grupo intervención (GI) y un segundo grupo de no deportistas o grupo control (GC). Para la selección de la población del GI se realizó una búsqueda de acuerdo a los logros deportivos en eventos nacionales e internacionales, el grupo control se constituyó de estudiantes universitarios. En la muestra seleccionada se realizaron mediciones antropométricas, screening cardiovascular y toma de muestra de sangre, previo a la toma de datos en la población realizó una prueba piloto de las diferentes mediciones en cinco sujetos del grupo control, posterior a los resultados favorables de la prueba piloto, se programaron las valoraciones. Las personas valoradas, firmaron el consentimiento informado, una vez realizada la toma de variables antropométricas y cardiovasculares, se realizó la toma de muestras de sangre las cuales fueron llevadas directamente al laboratorio de Biología Molecular para ser almacenadas y posteriormente analizadas. La población muestral fue identificada en los departamentos de Cundinamarca, Boyacá y Antioquia en deportes de atletismo, ciclismo y triatlón en diferentes modalidades. La metodología de la presente investigación estableció la toma de un total de 420 muestras, sin embargo y de acuerdo a las medidas generadas por la pandemia por COVID-19 en toda la población, donde se modificó el calendario deportivo y se generaron dinámicas propias en cada deporte en el retorno a las competencias propias del ciclo olímpico para la población intervención así como las restricciones en el regreso a la presencialidad en el sector de la educación, se presentó una disminución en la toma de muestras poblacional, por tanto el total de las muestras tomadas fue de 228 pertenecientes a ambos grupos de estudio. A medida que se fueron generando la toma de muestras en los dos grupos de estudio, se realizó la identificación y análisis de estudios de investigación relacionados con la temática con el fin de determinar el protocolo de procesamiento de las muestras de sangre. Se identificó y se aplicó el protocolo correspondiente para la extracción de ADN, cuantificación y purificación de las muestras para posteriormente realizar los procesos de amplificación. La amplificación del intron 16 se realizó en dos fases, en la primera fase se usa los primers GIIS y GAS programando en el termociclador Light Cycler96 para realizar una pre-incubación, amplificación de 2 ciclos y cooling. La segunda fase se caracteriza por la inclusión de los primers FYM y GIIS en una relación 1:1 programando en el termociclador una pre-incubación, amplificación de 30 ciclos, melting point y cooling. Durante el transcurso del proyecto se realizó la preparación y construcción de los documentos base para la escritura de los artículos correspondientes para el proyecto de investigación con participación de los maestrantes vinculados al proyecto. Así mismo se realizó la ponencia oral denominada: “Características genotípicas del gen ACE en deportistas de resistencia colombianos” en el VII Congreso nacional de investigación en ciencias del deporte celebrado el día 27 de octubre. Actualmente se sigue realizando la construcción de los artículos de investigación, así como la postulación a eventos nacionales e internacionales.

Semillero de Investigación ORIATROS - Biología celular y molecular del cáncer: Informe de actividades 2020-II

Méndez Callejas, Gina Marcela | 2021-02-15

Semillero de Investigación ORIATROS - Biología celular y molecular del cáncer: Informe de actividades 2021-I

Méndez Callejas, Gina Marcela | 2021-06-23

Topological properties and in vitro identification of essential nodes of the Paclitaxel and Vincristine interactomes in PC-3 cells

Delgado Carreño, Claudia | 2019

Background: Microtubule-targeting agents (MTAs) disrupt microtubule dynamics, thereby inducing apoptosis via mitochondrial pathway activation through the modulation in the expression of the Bcl-2 family. Methods: To describe topological features of the MTAs networks associated to intrinsic apoptosis induction in p53-null prostate cancer cells, we predicted and compared the interactomes and topological properties of Paclitaxel and Vincristine, and thus, the essential nodes corresponding with the pro- and anti-apoptotic proteins and their kinetics were subjected to experimental analysis in PC-3 cell line. Results: The essential nodes of the apoptotic pathways, TP53, and CASP3, were identified in both, Paclitaxel and Vincristine networks, but the intrinsic pathway markers BCL2, BAX, and BCL2L1 were identified as hub nodes only in the Paclitaxel network. An in vitro analysis demonstrated an increase in BimEL and the cleaved-caspase-3 proteins in PC-3 cells exposed to both treatments. Immunoprecipitation analysis showed that treatments induced the releasing of Bax from the anti-apoptotic complex with Bcl-2 protein and the role of BimEL as a de-repressor from sequestering complexes, in addition, new protein complexes were identified between BimEL or Bcl-2 and cleaved-caspase-3, contributing data to the Vincristine network for p53-null cells in response to MTAs. Conclusion: The differences in sensitivities, protein profiles, and protein complex kinetics observed between the drugs confirmed that the selectivity and stimulation of the apoptotic system vary depending on the cell's genotype, the drug used and its exposure period.